現(xiàn)在病原微生物的檢測(cè)方法豐富多彩。我們常規(guī)檢測(cè)的病原，可以針對(duì)病原本身去檢測(cè)，如使用顯微鏡，直接檢測(cè)病原（如細(xì)菌、真菌等），但是在臨床工作中應(yīng)用局限，不適用病毒檢測(cè)。還有一類是培養(yǎng)法，常規(guī)的細(xì)菌、真菌都可以采用培養(yǎng)技術(shù)，但是對(duì)于病毒而言，由于培養(yǎng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室條件要求較高，而且也無法滿足快速診斷的的要求，所以目前培養(yǎng)法在病毒診斷方面的應(yīng)用較少，多用于科研實(shí)驗(yàn)室。

　　還有其他方法，比如抗原檢測(cè)（針對(duì)病原微生物）和抗體（針對(duì)人體對(duì)病原微生物的免疫反應(yīng)）檢測(cè)。此外，最重要的，也是今天著重強(qiáng)調(diào)的分子生物學(xué)檢測(cè)方法。對(duì)于現(xiàn)在的感染性疾病而言，如果醫(yī)院想讓病原微生物診斷水平提高，盡可能滿足臨床需求，分子生物學(xué)檢測(cè)將會(huì)成為一個(gè)必不可少的手段。

　　檢測(cè)樣本采集有哪些注意事項(xiàng)？

　　流感病毒和一些非典型病原體（比如肺炎衣原體或者鸚鵡熱衣原體等），以及病毒不能獨(dú)立存活繁殖，多存在于粘膜上皮細(xì)胞內(nèi)。因此我們要注意，流感病毒感染，采樣的時(shí)候就不能輕描淡寫的在相應(yīng)部位輕輕的沾一下，建議稍微用力采集到呼吸道上皮細(xì)胞。脫落的上皮細(xì)胞可見于所有呼吸道分泌物。強(qiáng)調(diào)使用分子生物學(xué)方法檢測(cè)，最主要的一點(diǎn)就是分子生物學(xué)檢測(cè)的靈敏度高，即使原始樣本中病原量少也可以檢測(cè)出來。另外，應(yīng)注意，有些病原在健康人群是很少存在定植的情況，一般認(rèn)為健康人群少見甲流、乙流病毒定植，所以在就診人群中一旦檢測(cè)出來，同時(shí)患者有相關(guān)癥狀的話，即可確診。其他的呼吸道病毒，比如鼻病毒或呼吸道合胞病毒，在健康人群是有少量定植的，特別是兒童，這時(shí)要根據(jù)半定量結(jié)果，再結(jié)合患者本身的癥狀和免疫狀況綜合判斷。

　　臨床癥狀的嚴(yán)重程度和病毒量有關(guān)，這也解釋了為什么說最好不要僅報(bào)告一個(gè)陰性或陽(yáng)性的結(jié)果，建議分子生物學(xué)檢測(cè)時(shí)，報(bào)告一個(gè)半定量的結(jié)果或者在未來隨著技術(shù)的推進(jìn)，能夠報(bào)告一個(gè)定量的結(jié)果（如采用數(shù)字PCR技術(shù)），報(bào)告樣本里含有病毒的量。對(duì)于微生物實(shí)驗(yàn)室或分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的工作人員來說，由于采集呼吸道樣本的時(shí)候難于準(zhǔn)確定量，可報(bào)告給臨床一個(gè)CT值，即在熒光定量PCR中，擴(kuò)增曲線開始增高的循環(huán)數(shù)，CT值越小，說明原始樣本的病毒量越高。病毒量與病情相關(guān)，最初2-3天達(dá)到高峰。當(dāng)然，有些分子生物學(xué)方法，如恒溫?cái)U(kuò)增、擴(kuò)增產(chǎn)物電泳法檢測(cè)，是無法提供定量或半定量結(jié)果的。

　　流感病毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，樣本類型可包括鼻腔分泌物、鼻腔沖洗液、鼻咽拭子、咽拭子、咽沖洗液。

　　一般而言，咽部采集樣本病毒量略低。分子生物學(xué)比較靈敏，因此應(yīng)用的樣本種類比較廣泛。而抗原檢測(cè)的靈敏度不高，所以有時(shí)如果不是在病毒量高峰時(shí)采樣或者不是采集的鼻咽部拭子，而只是咽拭子，尤其是醫(yī)生、護(hù)士或者其他相關(guān)醫(yī)療人員沒有嚴(yán)格按照操作在咽部轉(zhuǎn)動(dòng)3~5周，略微用力的話，都可能導(dǎo)致陽(yáng)性率下降，患者可能是感染患者，但是沒有檢測(cè)出來。

　　下呼吸道樣本，包括痰液、氣管吸出物、Balf，都可以檢出病毒。如果懷疑肺炎，從口咽部到下呼吸道采樣也可以反映出來。一旦檢出，強(qiáng)烈指向患者存在相關(guān)部位感染。

　　因?yàn)榧琢?、乙流以及呼吸道合胞病毒與腺病毒、巨細(xì)胞病毒、EB病毒不同，為RNA病毒，容易被環(huán)境中RNA酶降解，建議保存于特定樣本保存液中送檢，其中含有抑制RNA酶的成分，能夠減少RNA降解，提高檢出的陽(yáng)性率。