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            細(xì)胞復(fù)蘇的操作步驟

            2023-01-16

              細(xì)胞復(fù)蘇,生物學(xué)的一種術(shù)語,是指將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細(xì)胞解凍之后重新培養(yǎng),細(xì)胞恢復(fù)生長的過程。操作步驟如下:

              1、實驗員戴上防護眼鏡打開液氮罐,將冷凍管從液氮中取出,迅速投入37℃水浴融化,在水浴中時用鑷子夾住細(xì)胞凍存管并在水浴中不時晃動。

              2、細(xì)胞融化后,在1分鐘內(nèi)將冷凍管移出。

              3、拿酒精棉球擦拭冷凍管外部殺菌消毒,晾干后放置在水浴上。

              4、開啟瓶蓋后把細(xì)胞轉(zhuǎn)入含有4mL培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中,然后把培養(yǎng)瓶移至培養(yǎng)箱,36℃~38℃培養(yǎng)1小時,讓細(xì)胞貼壁。

              5、細(xì)胞貼壁后,小心移棄培養(yǎng)基,加5mL新鮮培養(yǎng)基,在36℃~38℃中培養(yǎng)。

              6、細(xì)胞培養(yǎng)24小時后,更換新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)直到形成單層。

              7、詳細(xì)記錄復(fù)蘇細(xì)胞的名稱、數(shù)量、復(fù)蘇時間、存放部位等。細(xì)胞復(fù)蘇全程注意無菌操作。

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