MTT法檢測細胞活性的原理是什么
導(dǎo)讀MTT法是常用的一種細胞活性檢測方法,其原理是通過將MTT熒光染料作用于細胞內(nèi),利用細胞內(nèi)活性代謝產(chǎn)物還原MTT熒光染料為紫色雜質(zhì),通過檢測雜質(zhì)吸光光譜來判斷細胞的存活率和代謝活力。檢測時,步驟一般包括細胞處理、加入MTT染料等。 ...
MTT法是常用的一種細胞活性檢測方法,其原理是通過將MTT熒光染料作用于細胞內(nèi),利用細胞內(nèi)活性代謝產(chǎn)物還原MTT熒光染料為紫色雜質(zhì),通過檢測雜質(zhì)吸光光譜來判斷細胞的存活率和代謝活力。檢測時,步驟一般包括細胞處理、加入MTT染料、細胞還原MTT熒光染料、溶解細胞、吸光度檢測等。
1、細胞處理:將需要檢測的細胞培養(yǎng)在含有試驗物質(zhì)的培養(yǎng)基中,或者將不同條件下的細胞分別處理。
2、加入MTT染料:在細胞培養(yǎng)基中加入一定濃度的MTT熒光染料,MTT熒光染料會穿透細胞膜進入細胞內(nèi)部。
3、細胞還原MTT熒光染料:MTT熒光染料在細胞內(nèi)被代謝酶還原為紫色的雜質(zhì)。
4、溶解細胞:加入溶劑將細胞溶解,同時將還原后的紫色雜質(zhì)溶解在細胞培養(yǎng)基中。
5、吸光度檢測:使用酶標儀檢測細胞溶液的吸光度,MTT染料還原產(chǎn)生的紫色雜質(zhì)的吸光值與細胞的存活率和代謝活力成正比。通過檢測MTT還原后紫色產(chǎn)物在570-630 nm范圍內(nèi)的吸光值,計算細胞活性和細胞存活率。
MTT法通過檢測紫色雜質(zhì)吸光光譜來推斷細胞存活率和代謝活力,是一種便捷、直觀、快速的細胞學(xué)檢測方法,建議患者選擇正規(guī)的醫(yī)療機構(gòu)進行這項檢測。