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殘留DNA檢測(cè)方法在臨床上常用的是熒光染色法。具體操作如下：
1、打開(kāi)生物安全柜紫外燈照射半小時(shí)以上，照射完畢后，關(guān)閉紫外燈，打開(kāi)通風(fēng)機(jī)。
2、生物安全柜亮燈后，取酒精噴壺消毒操作臺(tái)面以及一次性無(wú)菌移液管。將消毒后的滅菌槍頭盒、細(xì)胞培養(yǎng)板等物品放入生物安全柜內(nèi)。
3、取出待檢樣品移入生物安全柜內(nèi)，使用無(wú)菌滴管將上清取出，移入試管內(nèi)。
4、準(zhǔn)備三個(gè)匯合度在30-40%的T25瓶Vero細(xì)胞，把培養(yǎng)上清、無(wú)抗生素培養(yǎng)基、支原體陽(yáng)性細(xì)胞分別加入到瓶?jī)?nèi)。
5、將三個(gè)瓶子用酒精消毒后置于培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)3-5天。將培養(yǎng)的Vero細(xì)胞分別接種在培養(yǎng)板內(nèi)，再將適量培養(yǎng)液分別加入培養(yǎng)板內(nèi)，蓋上蓋子搖晃混合，使細(xì)胞分散均勻。
6、將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)3-5天。取出培養(yǎng)基，用真空泵將培養(yǎng)基全部吸干凈，然后往培養(yǎng)板內(nèi)均勻加入無(wú)菌PBS溶液，搖晃漂洗后再吸走，重復(fù)三次。
7、最后加入新鮮的5ml固定液，放置15分鐘后吸走，等待自然晾干。
8、接著往孔中加入染液，避光染色半小時(shí)后吸走染液。往培養(yǎng)板中加入純水，搖晃清洗后吸走，重復(fù)三次后等自然晾干。
9、把自然晾干的培養(yǎng)板放置顯微鏡下，打開(kāi)熒光激發(fā)電源開(kāi)關(guān)，運(yùn)行熒光成像軟件，觀察培養(yǎng)板。
若需進(jìn)行該操作，建議前往正規(guī)醫(yī)院，在專(zhuān)業(yè)醫(yī)生的指導(dǎo)下進(jìn)行操作，保證檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性。
